Examinando por Materia "Enzymatic Digestion"
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Ítem Acceso abierto Comparación de métodos enzimáticos y comerciales para el aislamiento y expansión de células madres mesenquimales humanas derivadas de cordón umbilical, con potencial terapéutico(Universidad Latina de Panamá, 2026) Zhuo L., Wendy M. [autora]; Hernández, Jonathan [asesor]; Alves-Rosa, María Fernanda [directora]Esta investigación tuvo como objetivo estandarizar y comparar métodos de aislamiento y condiciones de cultivo de células madre mesenquimales humanas (hMSC) derivadas de cordón umbilical, con el fin de optimizar su obtención y expansión in vitro para aplicaciones en biotecnología y medicina regenerativa. Las hMSC representan una población celular de alto valor terapéutico debido a su capacidad de autorrenovación, diferenciación multipotente e importante actividad inmunomoduladora y paracrina. El estudio se desarrolló bajo un diseño experimental comparativo, evaluando dos métodos de aislamiento: digestión enzimática con colagenasa NB4 y un kit comercial estandarizado para disociación de tejido de cordón umbilical. Asimismo, se analizaron dos condiciones de suplementación del medio de cultivo: suero fetal bovino (SFB) y lisado de plaquetas humano (hPL), con el propósito de determinar su influencia en la adherencia, morfología, proliferación y viabilidad celular. Los cordones umbilicales fueron obtenidos bajo criterios éticos establecidos, sometidos a tamizaje serológico y molecular para descartar enfermedades infectocontagiosas, y procesados en un laboratorio con condiciones controladas de bioseguridad. El procedimiento experimental incluyó recepción, preparación del tejido, fragmentación mecánica, digestión enzimática o disociación mediante kit comercial, filtración, centrifugación y establecimiento del cultivo primario. Las células obtenidas mostraron capacidad de adherencia al plástico y morfología fibroblasto de característica de las hMSC. Se observó que ambos métodos permitieron la obtención de poblaciones celulares viables; sin embargo, el rendimiento inicial y la dinámica de expansión variaron según el método de aislamiento y el suplemento utilizado. El hPL evidenció un comportamiento favorable en la expansión celular, representando una alternativa potencialmente más segura frente al SFB en el contexto de futuras aplicaciones clínicas. En conclusión, la estandarización de protocolos de aislamiento y cultivo es fundamental para garantizar reproducibilidad, calidad biológica y proyección traslacional de las hMSC derivadas de cordón umbilical, fortaleciendo las bases técnicas para su desarrollo en terapias celulares avanzadas.